黑色素瘤模型由人类恶性黑色素瘤细胞(A375)组成。, 正常的, 人源性表皮角质形成细胞(NHEK)和正常, 人源性真皮成纤维细胞(NHDF)已培养成多层, CM恶性肿瘤不同阶段的高分化表皮伴黑色素瘤细胞. 在文化的不同阶段, 组织呈放射状生长期(RGP), 垂直生长期(VGP), 或转移性黑色素瘤表型. 细胞用无血清培养基在细胞培养插入物上培养, 并在体外皮肤技术的前沿达到分化水平. 在结构上, 黑色素瘤模型与体内黑色素瘤的进展非常相似, 从而为研究提供了有价值的工具, 理解, 并为最严重的皮肤恶性肿瘤之一开发预防和治疗方法.

黑色素瘤模型表现出与活体相似的形态和生长特征,这些特征是均匀的和高度可复制的. 这种全层皮肤模型的表皮由有组织的基底层组成, 尖尖的, 细粒度的, 以及类似于体内发现的角化表皮层. 真皮隔室由含有正常人真皮成纤维细胞(NHDF)的胶原基质组成。.

使用黑色素瘤组织的方案是明确和直接的. 十大网投彩票官网注册的黑色素瘤组织已被用于许多靶向和抗黑色素瘤药物.

图1

图1. 全层黑色素瘤皮肤模型中的人类转移性黑色素瘤细胞(A375. A375细胞在真皮/表皮交界处出现RGP黑色素瘤淋巴结(第11天). 随着培养时间的延长, 黑色素瘤淋巴结呈VGP形态(第18天),随后分离的细胞簇侵入真皮(转移性侵入)(第29天)。. 长箭头表示表皮与真皮交界处的黑色素瘤细胞群. 短箭头显示分离的黑色素瘤细胞团浸润真皮层.

图2

图2. 黑色素瘤FT皮肤模型的超微结构分析.

全层皮肤黑色素瘤模型(MLNM-FT-A375)透射电镜(TEM). A. 黑色素瘤细胞(M)与角质形成细胞(KC)相互作用区域. B. 黑色素瘤细胞与真皮底物相互作用区域(D). N代表原子核,N代表核仁. 箭头表示凋亡的黑色素瘤细胞

图3

图3. 含有转移性SK-Mel-28细胞的全层皮肤黑色素瘤模型(MLNM-FT). S-100抗体染色. 最初黑色素瘤细胞在真皮/表皮交界处形成小巢(第11天). 随后VGP肿瘤出现(第25天),随后观察到转移到真皮(第29天)。. 长箭头表示一些黑色素瘤细胞簇在表皮真皮交界处. 短箭头显示单个黑色素瘤细胞浸润真皮层.

图4

图4. n -钙粘着分子在MLNM-FT-A375全层黑色素瘤皮肤模型中的表达. N-Cadherin抗体染色,40X. N-Cadherin的表达随培养时间的增加而增加.

肿瘤侵袭及抗黑色素瘤药物筛选

十大网投彩票官网注册的黑色素瘤组织呈放射状生长阶段, 垂直生长期, 转移性黑色素瘤的表型, 与体内黑色素瘤的发展平行. 这个模型为肿瘤学家和癌症研究人员提供了一个有价值的研究工具, 理解, 并为最严重的皮肤恶性肿瘤之一开发预防和治疗方法. 浏览我们的黑色素瘤参考文献 十大网投彩票官网注册参考图书馆 看看医生和研究人员是如何使用我们的黑色素瘤组织的.

 

组织:

工具: 全层黑色素瘤皮肤构建(MLNM-FT-A375试剂盒)由24个组织组成. (纸巾“包”包含纸巾, 少量培养基, and plasticware; contact 十大网投彩票官网注册 for specific kit contents.)

基质: 使用单孔组织培养板插入(e.g. 微孔CM单孔组织培养板插入,孔径= 0.4µm,表面积= 0.6 cm2).

文化: 最初在水下,然后在气液界面.

组织学: 上皮:8-12层上皮细胞加上角质层(基底), 尖尖的, and 细粒度的 layers); Dermis: Collagen gel containing fibroblasts. 早期黑色素瘤细胞在真皮/表皮交界处形成淋巴结. 在后期黑色素瘤进展到RGP(放射状生长期), VGP(垂直生长期)并连续侵入真皮成分.

很多数字: 每周生产的纸巾批次都有一个特定的批号. 在批号的末尾附加一个字母,以区分给定批号中的单个试剂盒. 所有组织试剂盒在细胞方面都是相同的, medium, 处理, 培养条件, 等.

装运: 组织在4°C下运输,培养基补充,琼脂糖凝胶在6孔板中.

装运: 周一. 如有特殊要求,也可在星期四装运.

交付: 周二上午通过联邦快递优先服务(美国). 美国以外:周二至周四视地点而定.

保质期: 包括运输时间在内,纸巾在使用前可在4°C下保存3天. 但是,除非必要,否则不建议延长储存期限. 除了, 如果组织在同一天连续使用,将获得最佳的再现性, e.g. 周二下午或之后在4°C下过夜(周三上午).

实验时长: 培养可持续4周,观察黑色素瘤的发展和进展,并保持正常表皮形态. Cultures must be fed every other day using 十大网投彩票官网注册 culture stands (MEL-STND; click on this link for photo) along with 5.0 ml MLNM-FT-MM.

替代组织:

MLNM-FT-A375(第6天) 早期MLNM-FT-A375组织. 组织没有在气液界面培养. 客户收到所需的培养基(MLNM-FT-GM)继续培养和生产MLNM-FT-A375. 由于本产品的专有性质,在订购前需要与十大网投彩票官网注册技术代表进行讨论. 设计用于研究黑色素瘤发展的早期阶段,其中实验设计规定使用早期组织.

MLNM-FT-EXP: 与MLMN-FT-A375相同,只是十大网投彩票官网注册用客户提供的黑色素瘤细胞代替了A375细胞.

细胞:

类型: Human melanoma cells (A375); Normal human epidermal keratinocytes (NHEK); Normal human dermal fibroblasts (NHDF).

来自: 马里gnant melanoma cell line (A375); Neonatal-foreskin tissue (NHEK); Neonatal skin (NHDF);

选择: 人类恶性黑色素瘤细胞SK-Mel-28.

筛选: HIV,乙型肝炎,丙型肝炎,支原体.

介质:

基础培养基: mcdb153基础培养基.

生长因子/激素:表皮生长因子, 胰岛素, 氢化可的松和其他专有的表皮分化刺激剂.

血清: 没有一个.

抗生素: 庆大霉素5µg/ml(为庆大霉素正常水平的10%).

抗真菌剂: 两性霉素B.25µg / ml.

酸碱指示剂: 酚红(0.0012 g/l).

其他添加剂: 用于增强表皮屏障形成的脂质前体(专有).

分析/维护medium: MLNM-FT-MM用于分析以及MLNM-FT-A375组织的长期维护.

质量控制和无菌:

目视检查: 所有组织都经过目视检查,如果发现物理缺陷, 纸巾被拒绝装运.

最终用途测试:保留生产批次的纸巾, 再生长7天, 修复组织学, 和分析.

不育: 在整个生产过程中使用的所有介质都要进行无菌检查. 维持培养基加或不加抗生素孵育1周,检查无菌性. 用于运输的24孔板上的琼脂糖凝胶也孵育1周,并检查任何污染迹象.

病原体筛查: 所有细胞都经过筛选,使用PCR检测HIV、乙肝和丙肝呈阴性. 然而,没有任何已知的测试方法可以完全保证细胞是无病原体的. 因此, 这些产品和所有人类衍生产品应按照CDC-NIH手册中建议的BSL-2(生物安全等级2)或更高级别处理, 微生物和生物医学实验室的生物安全,” 1998. 如需进一步帮助,请联系您的现场安全专员或十大网投彩票官网注册技术服务.

不合格批件通知: 如果纸巾没有通过我们的质量检验或无菌检验, 我们会通知顾客,并在适当情况下免费更换纸巾. 因为我们的QC和无菌检测是在出货后完成的, 我们会尽快发出通知(在正常情况下,我们会在装运后8天内发出通知).

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